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Introducción
El Departamento de Patología Clínica y el Laboratorio de Microbiología del Centro Hospitalario Pereira Rossell han acompañado a los demás sectores del hospital en las acciones del Plan de Invierno.
En el año 1998 se realizó un Plan Piloto, en colaboración con el Departamento de Bacteriología y Virología de la Facultad de Medicina, Universidad de la República, y se comenzaron a estudiar los agentes virales causantes de infecciones respiratorias en niños hospitalizados por técnicas de inmunofluorescencia. En 1999, se incorporó la investigación sistemática del diagnóstico viral en estos pacientes. En el 2000, se comenzó a realizar la investigación de antígenos virales en el Laboratorio de Microbiología del CHPR, utilizando ensayos inmunocromatográficos. En 2016 se incorporaron en este laboratorio técnicas de detección de ácidos nucleicos.
Técnicas implementadas
Detección de antígenos virales. Realizada en secreciones respiratorias que se obtienen mediante un aspirado nasofaríngeo (ANF) por técnica inmunocromatográfica. Los virus estudiados fueron influenza A y B, virus respiratorio sincicial (VRS) y adenovirus.
La técnica de inmunocromatografía tiene una sensibilidad entre 50% y 80%, y una especificidad que varía entre 70% y más de 90%. Estos valores surgen de estudios y revisiones publicados que en general fueron realizados de cada virus en forma independiente. La mayoría de las publicaciones se refieren fundamentalmente a influenza A y B y VRS, y en menor cantidad a adenovirus. Los estudios que informaron mejor comportamiento para influenza refirieron una especificidad cercana a 100%, con numerosos falsos negativos. Las investigaciones sobre VRS informaron valores elevados de especificidad, con sensibilidad más elevada que para influenza, pudiendo alcanzar 80%1-9.
El rendimiento de esta técnica está influenciado por cambios que ocurren en la prevalencia de los virus (circulación estacional), variaciones en las cepas virales circulantes, el tiempo transcurrido desde el comienzo de la enfermedad hasta el momento de recolección de la muestra (las muestras precoces tienen mejor performance que las tardías), el tipo y calidad de la muestra respiratoria (los aspirados nasofaríngeos son mejores muestras que los hisopados nasales o faríngeos), la edad (los niños tienen mayor carga viral que los adultos y los niños pequeños tienen cargas superiores que los más grandes), y finalmente la severidad de la enfermedad1-9.
Detección de ácidos nucleicos. Esta técnica se incorporó en 2016. Se realiza en una plataforma cerrada que detecta ácidos nucleicos de patógenos que causan infecciones respiratorias. Esto ha permitido, en algunos casos, identificar agentes que no se estaban estudiando, así como confirmar o descartar resultados de difícil interpretación, como coinfecciones o casos de influenza al inicio de los empujes epidémicos. Las muestras estudiadas se recogen en medio de transporte viral. Esta plataforma (FilmArray, Biofire) detecta 20 agentes vin culados a infecciones respiratorias, 17 virus y 3 bacterias (Tabla 1)10.
En la (Tabla 2) se describen las ventajas y desventajas de las técnicas directas para diagnóstico virológico.
Recursos humanos y materiales, logística
La realización de estas técnicas requiere recursos humanos especializados y entrenados (licenciados en laboratorio clínico, auxiliares técnicos de laboratorio).
Durante los meses fríos del año el aumento en la demanda de estas técnicas determina un incremento muy importante en los insumos necesarios. Dicho aumento también modifica la logística del Laboratorio de Microbiología, que debe extender su horario de funcionamiento, dar prioridad a áreas críticas y acortar los tiempos de espera de resultados.
